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高保真DNA聚合酶的定義及如何選擇
2022-11-08
DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*組成部分，是參與DNA復(fù)制中的重要酶，被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個(gè)研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時(shí)間里，從早期被發(fā)現(xiàn)的TaqDNA聚合酶到現(xiàn)在，酶越來越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對(duì)舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場(chǎng)需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進(jìn)行介紹。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心，聚合中心具有5'→3...
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李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題（一）
2022-11-07
涉及產(chǎn)品EZTransPlus細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（Ⅱ）貨號(hào)：AC04L011EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（高效）貨號(hào)：AC04L091/AC04L092EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（低毒）貨號(hào)：AC04L098/AC04L099其他轉(zhuǎn)染產(chǎn)品EZTransPro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）貨號(hào)：AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA轉(zhuǎn)染試劑貨號(hào)：AC04L051李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題（一）Q1：李記有3款轉(zhuǎn)染試劑，這3款有什么區(qū)別？和Li**對(duì)比效果如何...
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細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一
2022-10-31
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透...
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MH培養(yǎng)基的原理及用法
2022-10-20
MH培養(yǎng)基為MH瓊脂培養(yǎng)基，微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫，指的是水解酪蛋白。所以MH培養(yǎng)基也成為水解酪蛋白培養(yǎng)基。常用作培養(yǎng)基原材料，提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子。MH培養(yǎng)基的原理：牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。MH培養(yǎng)基的成分：酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養(yǎng)基的用法：稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。...
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介紹幾種常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法
2022-09-28
細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)主要分為三大類：化學(xué)法、物理法及生物學(xué)法。但是沒有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)的，即沒有任何方法適用于所有細(xì)胞和所有實(shí)驗(yàn)。因而只有依據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)要求選擇理想的方法，才能獲得漂亮的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面介紹幾種常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法：1、DEAE-右旋糖苷法常言道：同性相斥，異性相吸。因而，當(dāng)帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸中帶負(fù)電的磷酸骨架相遇，妥妥的火花四射，而后會(huì)被細(xì)胞膜抱團(tuán)相擁并通過細(xì)胞內(nèi)吞作用迎客到家。該法可用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，操作相對(duì)簡(jiǎn)單、結(jié)果可重復(fù)，但是對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作...
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分析影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的因素
2022-09-27
細(xì)胞轉(zhuǎn)染指的是將外源分子如DNA、RNA等導(dǎo)入到真核細(xì)胞內(nèi)部的技術(shù)。隨著基因和蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為科研實(shí)驗(yàn)中常用的技術(shù)手段之一。對(duì)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)染試劑、轉(zhuǎn)染方法、細(xì)胞狀態(tài)等都會(huì)影響到細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率，本文主要對(duì)影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的8個(gè)因素做一介紹。1.轉(zhuǎn)染試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可以選擇不同的轉(zhuǎn)染試劑，轉(zhuǎn)染試劑的選擇又可以根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的文獻(xiàn)，已經(jīng)有很多細(xì)胞株被成功轉(zhuǎn)染，通過文獻(xiàn)資料可以參考最適的轉(zhuǎn)染試劑，當(dāng)然也要根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求選擇。一般來說轉(zhuǎn)染試劑的要求是低毒，...
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胎牛血清使用中的常見問題解答
2022-09-19
1、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...
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提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的方法有哪些？
2022-09-15
轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。分為物理介導(dǎo)方法：電穿孔法、顯微注射和基因槍；化學(xué)介導(dǎo)方法：如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)；生物介導(dǎo)方法：有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目前轉(zhuǎn)染效率較高的方法，同時(shí)具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢(shì)。但是病毒轉(zhuǎn)染方法的準(zhǔn)備程序復(fù)雜，常常對(duì)細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性，在一般實(shí)驗(yàn)室中很難普及。其它物理和化...
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