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PEI轉(zhuǎn)染試劑的原理及應(yīng)用
2023-05-15
PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種常用的基因轉(zhuǎn)染試劑，它可以將外源DNA快速高效地轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)，常用于基因表達(dá)、RNA干擾等研究領(lǐng)域。本文將介紹PEI轉(zhuǎn)染試劑的原理、優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用。PEI（聚乙烯亞胺）是一種陽(yáng)離子聚合物，具有良好的DNA結(jié)合能力。在細(xì)胞培養(yǎng)基中，PEI可以與外源DNA形成復(fù)合物，并通過(guò)靜電相互作用與細(xì)胞膜結(jié)合，從而將DNA引導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。這種轉(zhuǎn)染方式稱(chēng)為PEI轉(zhuǎn)染。PEI轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)點(diǎn)在于其高效性和安全性。相對(duì)于其他轉(zhuǎn)染試劑，PEI轉(zhuǎn)染試劑可以實(shí)現(xiàn)更高的轉(zhuǎn)染效率，甚至在...
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標(biāo)記二抗的選擇及應(yīng)用實(shí)例
2023-05-11
標(biāo)記二抗的作用：二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體，上面通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于標(biāo)記二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛，如westernblot(通過(guò)與特異性抗體結(jié)合來(lái)鑒定蛋白質(zhì))，ELISA，免疫組織化學(xué)(檢測(cè)組織中的特異性抗原)，免疫細(xì)胞化學(xué)(通過(guò)免疫學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞的抗原組成)，流式細(xì)胞術(shù)及免疫沉淀(通過(guò)抗原與抗體的特異性結(jié)合作用來(lái)分離相應(yīng)抗原)。二抗針對(duì)某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性，因而使用標(biāo)記二抗可以免去對(duì)每一個(gè)...
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選購(gòu)線粒體染色試劑盒要考慮哪些因素？
2023-04-13
線粒體染色試劑盒是一種用于分離、純化、檢測(cè)和定量分析線粒體的試劑盒。它可以用于研究線粒體DNA含量、線粒體膜電位、線粒體膜透過(guò)性等線粒體功能和結(jié)構(gòu)方面的內(nèi)容。其作用和原理如下：線粒體染色試劑盒作用：1.分離和純化線粒體：通過(guò)離心、低速離心分離和高速離心純化方法，使線粒體從細(xì)胞中分離出來(lái)。2.檢測(cè)線粒體DNA含量：線粒體染色試劑盒可以檢測(cè)線粒體DNA含量。3.測(cè)量線粒體膜電位：線粒體染色試劑盒還可以測(cè)量線粒體膜電位。4.測(cè)量線粒體膜透過(guò)性：線粒體染色試劑盒可以測(cè)量線粒體膜透過(guò)性...
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蛋白電泳試劑盒的操作方法介紹
2023-04-04
蛋白電泳試劑盒是一種用于分離和檢測(cè)蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)材料。它包含有需要用到的試劑和工具，可以快速、方便地進(jìn)行蛋白質(zhì)分離和檢測(cè)。蛋白電泳試劑盒主要用于分離和檢測(cè)蛋白質(zhì)樣品。通過(guò)其含有的試劑和工具，可以進(jìn)行凝膠制備、電泳分離、染色和凝膠圖像分析等步驟，實(shí)現(xiàn)不同數(shù)量和質(zhì)量的蛋白質(zhì)的分離和檢測(cè)。蛋白電泳試劑盒的原理是利用電泳技術(shù)分離蛋白質(zhì)，當(dāng)電場(chǎng)作用于凝膠中的蛋白質(zhì)時(shí)，它們會(huì)向負(fù)極移動(dòng)。不同大小和電荷的蛋白質(zhì)會(huì)根據(jù)其遷移速度和遷移距離而分離出來(lái)。分離完成后，通過(guò)染色方法可以使蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色...
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瓊脂糖凝膠與核酸電泳小知識(shí)分享
2023-03-20
影響核酸電泳遷移率的幾個(gè)因素1、核酸分子大小在一定濃度的瓊脂糖凝膠中，DNA片段遷移距離和其含有的堿基對(duì)數(shù)量成反比，因此可以通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)條帶遷移距離進(jìn)行比較，由此得出目的條帶的大小，但這僅對(duì)雙鏈線性的DNA比較準(zhǔn)確(DNAMarker一般為雙鏈線狀DNA)，且對(duì)大于20kb的DNA不適用(普通瓊脂糖凝膠很難將其分開(kāi))。2、核酸分子構(gòu)象DNA分子在電場(chǎng)中的遷移速度不僅和分子量有關(guān)，還和它本身的構(gòu)象有關(guān)。相同分子量的線狀、開(kāi)環(huán)和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中的移動(dòng)速度不一樣，移動(dòng)速度次...
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簡(jiǎn)單介紹PEI轉(zhuǎn)染試劑的保存方法
2023-03-15
一、PEI轉(zhuǎn)染試劑的作用PEI轉(zhuǎn)染試劑，全稱(chēng)聚乙烯亞胺（polyethylenimine），是一種常見(jiàn)的DNA、RNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑。PEI會(huì)與DNA形成一種復(fù)合物，并將DNA導(dǎo)入人體細(xì)胞內(nèi)，使其表達(dá)您需要的蛋白質(zhì)。二、PEI轉(zhuǎn)染試劑的原理PEI轉(zhuǎn)染試劑的原理是利用PEI分子所帶上的各種官能團(tuán)對(duì)DNA或RNA質(zhì)粒進(jìn)行吸附，形成一個(gè)復(fù)合物，再將該復(fù)合物轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)，使DNA或RNA質(zhì)粒得以進(jìn)入細(xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)。而PEI分子帶上的陽(yáng)離子基團(tuán)能夠與細(xì)胞的負(fù)電荷相結(jié)合，從而達(dá)到...
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高保真DNA聚合酶的操作方法介紹
2023-03-09
高保真DNA聚合酶是一種具有高準(zhǔn)確性和高速度的酶，廣泛應(yīng)用于PCR擴(kuò)增、突變篩選、基因克隆、DNA測(cè)序等領(lǐng)域。其在基因工程和生物技術(shù)研究中有著十分重要的作用。作用原理：高保真DNA聚合酶可將DNA單鏈合成DNA雙鏈，并對(duì)DNA進(jìn)行擴(kuò)增。該酶的作用機(jī)理基于DNA聚合酶基本的催化反應(yīng)機(jī)制：利用DNA單鏈為模板，在DNA聚合酶的作用下，引物與模板互補(bǔ)結(jié)合進(jìn)行DNA聚合反應(yīng)。高保真DNA聚合酶的主要特點(diǎn)是：具有一定的3’-5’外切活性，能修正因PCR擴(kuò)增引入的多種誤差，如插入、缺失、...
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DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點(diǎn)
2023-02-22
DNA聚合酶是細(xì)胞復(fù)制DNA的重要作用酶，目前為止已發(fā)現(xiàn)有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ，都與DNA鏈的延長(zhǎng)有關(guān)。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點(diǎn)：都能以DNA為模板，從5'向3'進(jìn)行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應(yīng)。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點(diǎn)：1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶沒(méi)有，當(dāng)需要解開(kāi)雙鏈的...
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