產(chǎn)品描述

信使核糖核酸（mRNA）在細(xì)胞質(zhì)中啟動(dòng)蛋白質(zhì)翻譯，不需要進(jìn)入細(xì)胞核，可實(shí)現(xiàn)比DNA轉(zhuǎn)染更快的蛋白表達(dá)，且避免基因整合風(fēng)險(xiǎn)。

EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑是一種結(jié)合了陽離子聚合物和脂質(zhì)體優(yōu)點(diǎn)的轉(zhuǎn)染試劑，協(xié)同促進(jìn)轉(zhuǎn)染復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞，隨后在胞質(zhì)中釋放，能夠在多種細(xì)胞類型中實(shí)現(xiàn)高效、低毒的轉(zhuǎn)染效果。

訂購信息

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃保存，有效期 6 個(gè)月；-30℃至-10℃保存，有效期12個(gè)月。注：避免反復(fù)凍融。

使用方法（以 24 孔板為例，其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請(qǐng)參考表 1）

1． 接種細(xì)胞

對(duì)于貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一天，將細(xì)胞按照每孔1-2x105個(gè)細(xì)胞的量進(jìn)行鋪板，使其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度為60%-80% 為佳。

對(duì)于懸浮細(xì)胞：轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前，用PBS清洗細(xì)胞1-2次，用250 μL Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基 (無血清) 重懸細(xì)胞，在24孔板中進(jìn)行細(xì)胞鋪板，細(xì)胞密度為60-80%。

2． 準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物

(1)  對(duì)于每孔細(xì)胞，將 0.5 μg待轉(zhuǎn)染mRNA加入到1.5mL離心管中，加入2 μL轉(zhuǎn)染試劑與mRNA 混合，室溫孵育3 min。

(2)  往上述混合物中加入100 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無血清)，輕輕混勻，在室溫下靜置30 min，形成轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物。

(3)  30 min后，往上述復(fù)合物中加入250 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無血清)，輕輕混勻。

3． 轉(zhuǎn)染細(xì)胞

(1)  細(xì)胞用PBS清洗1-2次，將上述350µL轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物加入每孔細(xì)胞。

(2)  在 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)12 h，無需更換新的培養(yǎng)液，之后即可檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果。若需更長(zhǎng)時(shí)間轉(zhuǎn)染，可在轉(zhuǎn)染12 h后補(bǔ)充500 μL培養(yǎng)基 (含血清)，總體積達(dá)到 500μL，即達(dá)到常規(guī)的培養(yǎng)皿使用培養(yǎng)液的量，12-36 h后再進(jìn)行檢測(cè)。

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