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TECHNICAL ARTICLESsirna轉(zhuǎn)染實驗步驟與轉(zhuǎn)染試劑推薦
2024-09-06 sirna轉(zhuǎn)染實驗步驟(以24孔板為例)1.接種細胞對于貼壁細胞:轉(zhuǎn)染前一天,將細胞按照每孔1-2x10^5個細胞的量進行鋪板,使其在轉(zhuǎn)染時密度為60%-80%為佳。對于懸浮細胞:轉(zhuǎn)染當(dāng)天,配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前,用PBS清洗細胞1-2次,用250μLOpti-MEMI減血清培養(yǎng)基(無血清)重懸細胞,在24孔板中進行細胞鋪板,細胞密度為60-80%。2.準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑-siRNA復(fù)合物(或轉(zhuǎn)染試劑-miRNA復(fù)合物)(1)對于每孔細胞,取2μLsiRNA(20μM,DEP...從實驗室到臨床:無血清細胞存凍液的轉(zhuǎn)化應(yīng)用之路
2024-08-26 在生物醫(yī)學(xué)研究和細胞治療領(lǐng)域,細胞的長期保存與復(fù)蘇是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的細胞冷凍保存技術(shù)多依賴于含血清的培養(yǎng)基,但血清來源的不確定性及可能引入的污染,限制了其在某些領(lǐng)域的應(yīng)用。無血清細胞存凍液作為一種新興的細胞保存解決方案,為細胞冷凍保存技術(shù)開辟了新的篇章。本文將深入探討無血清細胞存凍液的原理、優(yōu)勢及其在細胞保存領(lǐng)域的重要性。無血清細胞存凍液是一種專為細胞冷凍保存設(shè)計的無血清、無蛋白的保存液。它通常含有細胞保護劑,如二甲基亞砜(DMSO)、乙二醇等,這些成分能夠減少細胞在冷...李記生物預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(蛋白Marker的分類與選擇)
2024-08-23 蛋白Marker即蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn),是幾種已知分子量的蛋白質(zhì)的混合物,像“尺子”一樣用來指示蛋白質(zhì)條帶的大小。在WesternBlot實驗中,蛋白Marker主要是用來指示蛋白條帶所對應(yīng)的分子量大小,此外,蛋白Marker還可以用來輔助判斷蛋白轉(zhuǎn)膜是否成功或蛋白在凝膠上的電泳進度等作用,所以選擇合適的蛋白Marker也是實驗成功的重要條件之一。李記生物預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量,以上2個圖片為兩種緩沖體系下的電泳示意圖。適合作為SDS-PAG...蛋白酶K的酶學(xué)特性及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的重要性
2024-08-17 蛋白酶K,屬于一種廣譜蛋白酶,由白色念珠菌(Candidaantarctica)發(fā)酵產(chǎn)生。它能夠在較寬的pH值范圍內(nèi)(pH4-12)保持活性,且在高溫條件下(65℃)仍能穩(wěn)定工作,這種穩(wěn)定性使蛋白酶K能夠在多種實驗條件下發(fā)揮其作用,成為科研人員手中的得力助手。在分子生物學(xué)領(lǐng)域,蛋白酶K的應(yīng)用尤為廣泛。在DNA提取過程中,蛋白酶K能夠高效地降解細胞和組織中的蛋白質(zhì),包括那些與DNA緊密結(jié)合的組蛋白,從而釋放出純凈的DNA,為后續(xù)的PCR擴增、測序等實驗提供高質(zhì)量的DNA模板。此...掃碼加微信
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