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  • 細胞培養(yǎng)中馬血清的作用有哪些

    2020-06-19 馬血清采自健康馬血液為原料,封閉系統(tǒng)內無菌采血,微孔過濾而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、超低內毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,促細胞生長繁殖效果佳,適用于細胞、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏、單抗研制,是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。細胞在單純的培養(yǎng)基中不能存活,在特殊類型的細胞培養(yǎng)中必須提供某些營養(yǎng)物質和生長因子才能是細胞得以生長并維持生長狀態(tài)?;A培養(yǎng)基常常要添加血清,血清終濃度多為5-20%。特殊用途的血清來源需用經驗確定。廣泛應用的...
  • 說一說胎牛血清在細胞培養(yǎng)研究中的重要作用

    2020-05-18 胎牛血清采用心臟封閉穿刺的方法采自孕6~8月孕齡的健康母牛腹中的胎牛。通過生物材料合成吸附技術和低溫進行前期處理,去除細菌、病毒、支原體、抗體等影響血清質量的因素,然后再在凈化車間中進行過濾分裝。胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。要說為什么很多細胞培養(yǎng)的科研人都用到胎牛血清,那就不得不說說胎牛血清那極為重要的作用。1.提供維持細...
  • ELISA常見的組織樣本制備方法

    2020-05-15 為了保證ELISA實驗數(shù)據(jù)的可靠性,在收集標本前都必須有一個完整的計劃。我們提倡新鮮樣品應盡早檢測,對收集后一周內檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。如有特殊原因需要周期性收集樣本,在取材后講標本及時分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰箱與室溫有一定溫差,蛋白容易降解,直接影響實驗質量,故應避免反復凍融。不同的樣本請根據(jù)實際情況處理。樣品制備方法1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再...
  • 血清中的沉淀物對細胞培養(yǎng)有什么影響?

    2020-04-26 細胞生長,我們的試驗以及經驗表明沉淀物不會影響細胞培養(yǎng),我們的客戶以及其它血清生產商也證明了這一點。過濾,如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物,血清將很難過濾。一般說來,因為在血清生產時后已經經過100nm或者40nm的過濾處理,并且經過了嚴格的無菌檢測,因此不推薦再過濾用于細胞培養(yǎng)的血清。在實驗室中沒有必要再過濾處理血清,在大規(guī)模的細胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。污染,磷酸鈣往往被誤認為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀,因此就會比較警覺的去...
  • 外泌體在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用與研究

    2020-04-16 外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體*于綿羊網織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運...
  • 怎么處理牛血清白蛋白的常見問題

    2020-03-25 牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保護或載體作用,不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對多數(shù)底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更*,并可實現(xiàn)重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,牛血清白蛋白可以使酶更加穩(wěn)定,因為在不含牛血清白蛋白的反應緩沖液中,許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限...
  • 蛋白酶K具有廣泛的底物特異性

    2019-12-27 蛋白酶K具有廣泛的底物特異性。即便存在洗滌劑的情況下,其仍可降解許多非變性狀態(tài)的蛋白質。蛋白酶K分離自一種可在角質上生長的真菌白色側齒霉菌(Engyodontiumalbum)(前稱腐生真菌(Tritirachiumalbum)。因此,蛋白酶K能夠降解非變性狀態(tài)的角質(頭發(fā)),因而稱為“蛋白酶K”。1其切割的主要位點為帶有封閉氨基基團、鄰近脂族或芳香族氨基酸羧基端的肽鍵。因其廣泛的特異性,其較為常用。蛋白酶K(ProteinaseK),相對分子量約為29.3kDa,是一種切割...
  • 如何提取外泌體?都有哪些方法?

    2019-11-26 外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體于綿羊網織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載...
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