在生命科學(xué)研究和藥物開發(fā)領(lǐng)域，對細胞增殖和毒性進行快速、準確的定量分析是至關(guān)重要的基礎(chǔ)實驗。傳統(tǒng)的檢測方法往往操作繁瑣、靈敏度有限或具有放射性風險。CCK-8試劑盒（Cell Counting Kit-8）的出現(xiàn)，以其高靈敏度、操作簡便和安全無毒的顯著優(yōu)勢，迅速成為全球?qū)嶒炇覐V泛采用的細胞活性檢測工具，極大地推動了細胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)和藥理學(xué)等領(lǐng)域的研究進程。
CCK-8試劑盒的核心是一種名為WST-8的水溶性四唑鹽。其檢測原理巧妙地利用了活細胞線粒體中脫氫酶的催化作用。在活細胞中，WST-8能被這些脫氫酶還原生成一種橙黃色的水溶性甲臜產(chǎn)物。該產(chǎn)物的生成量與活細胞的數(shù)量成正比，因此通過酶標儀在450nm波長處測定其吸光度（OD值），即可間接反映細胞的增殖活性或存活率。由于甲臜產(chǎn)物是水溶性的，無需像傳統(tǒng)的MTT法那樣進行溶解步驟，避免了因結(jié)晶溶解不充分帶來的誤差，使檢測過程更加簡便、結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。
CCK-8試劑盒的優(yōu)勢體現(xiàn)在多個方面。首先是高的靈敏度，其檢測下限遠低于MTT等方法，尤其適用于低密度細胞的檢測。其次是操作流程的簡化，整個檢測過程僅需一步——將CCK-8試劑直接加入細胞培養(yǎng)孔中，孵育1-4小時后即可讀數(shù)，無需換液，也無需添加任何有機溶劑。這不僅大大縮短了實驗時間，也減少了對細胞的干擾，保證了檢測結(jié)果的準確性。此外，WST-8對細胞毒性極低，檢測完成后細胞仍可繼續(xù)培養(yǎng)用于其他實驗，實現(xiàn)了珍貴樣本的再利用。最重要的是，CCK-8不含放射性物質(zhì)，對實驗人員和環(huán)境均安全無害，符合現(xiàn)代實驗室的安全要求。
在藥物篩選中，它是評估候選藥物對腫瘤細胞或其他靶細胞抑制或殺傷效應(yīng)的核心工具，能夠快速繪制劑量-效應(yīng)曲線，計算半數(shù)抑制濃度（IC50）。在細胞生物學(xué)研究中，它被用于測定細胞因子、生長因子等生物活性分子對細胞增殖的影響。在毒理學(xué)評價中，CCK-8可用于檢測化學(xué)物質(zhì)、環(huán)境污染物或納米材料對細胞的毒性作用。此外，它在細胞增殖動力學(xué)研究、血清學(xué)檢測以及細胞耐藥性分析等方面也發(fā)揮著重要作用。
更新時間：2025-10-16
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