99久免费视频精品,人妻秘书汗と接吻に満ちた视频,一区二区三区精华液,特级aaaaaaaaa毛片免费视频

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 干貨分享 | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇避坑指南

干貨分享 | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇避坑指南

更新時(shí)間:2025-01-08      點(diǎn)擊次數(shù):138
  細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),直接影響細(xì)胞存活率和活力,關(guān)系到后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癜凑沼?jì)劃有效地進(jìn)行。要想做好細(xì)胞凍存和復(fù)蘇,首先請(qǐng)牢記下面這四個(gè)字:
 
  慢凍快融!
 
  1、為什么要慢凍快融?
 
  凍存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中的水會(huì)形成冰晶。如果直接將細(xì)胞凍存到 -196℃ 的液氮中,由于凍結(jié)過程中胞外溶液中的水先結(jié)冰,使胞外溶液不斷濃縮,引起細(xì)胞電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水及蛋白質(zhì)變性等,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞受到機(jī)械性損傷。
 
  2、細(xì)胞凍存-讓你細(xì)胞安心沉睡
 
  3、細(xì)胞復(fù)蘇-讓細(xì)胞滿血復(fù)活
 
  ■ 細(xì)胞拿取
 
  盡量減少樣品從液氮或 -80℃ 取出到放置在解凍裝置中之間被動(dòng)升溫的時(shí)間,否則會(huì)大大影響細(xì)胞活力。如果儲(chǔ)存裝置和解凍裝置相隔較遠(yuǎn),可使用裝有干冰 (-80°C) 或液氮 (-196°C) 的隔熱容器臨時(shí)保存和運(yùn)送細(xì)胞。
 
  復(fù)蘇后第二天發(fā)現(xiàn)細(xì)胞沒有活?好不容易復(fù)蘇的細(xì)胞竟然污染了?怎么才能讓細(xì)胞滿血復(fù)活呢?繼續(xù)和小 M 一起往下看吧!■ 細(xì)胞拿取
 
  盡量減少樣品從液氮或 -80℃ 取出到放置在解凍裝置中之間被動(dòng)升溫的時(shí)間,否則會(huì)大大影響細(xì)胞活力。如果儲(chǔ)存裝置和解凍裝置相隔較遠(yuǎn),可使用裝有干冰 (-80°C) 或液氮 (-196°C) 的隔熱容器臨時(shí)保存和運(yùn)送細(xì)胞。(注意:從液氮中取細(xì)胞時(shí)要佩戴護(hù)目鏡和手套,謹(jǐn)防凍傷及凍存管爆炸!)
 
  ■ 解凍方式a) 解凍細(xì)胞時(shí)需要快速升溫 (50~100℃/min) 才能最大保存細(xì)胞活力,解凍方式是 37℃ 水浴[3]。從液氮或 -80℃ 取出凍存的細(xì)胞后,稍擰松管蓋,防止解凍過程中凍存管炸裂。放入 37℃ 水浴中,持續(xù)搖晃 1-2 分鐘直至解凍。
 
  通常建議在可見冰融化但樣品仍然冰冷(~0℃)時(shí)立即停止解凍,常見的做法是在只剩下一小片冰時(shí)從水浴鍋中取出樣品。升溫至室溫或更高溫度會(huì)增加冷凍保護(hù)劑的細(xì)胞毒性,這會(huì)極大影響細(xì)胞活力[1]。
 
  b) 不建議室溫解凍細(xì)胞,因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
 
  c) 為降低污染風(fēng)險(xiǎn),水浴解凍時(shí)凍存管管口要高于水面,避免水流入凍存管,水浴鍋中的無(wú)菌水也要定期更換。
 
  ■ 稀釋
 
  解凍后應(yīng)盡快稀釋,以減少 DMSO 的細(xì)胞毒性。按照培養(yǎng)基:凍存液 ≥10:1 的比例加入培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋,然后離心并更換培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,這樣可以減少由滲透壓變化導(dǎo)致的細(xì)胞應(yīng)激。
 
  ■ 換液
 
  依據(jù)細(xì)胞狀態(tài),在細(xì)胞貼壁后或 24 h 后換液,繼續(xù)培養(yǎng)。
微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號(hào):滬ICP備2023007219號(hào)-1
久久久久亚洲av无码专区| 欧美性生 活18~19| 国产探花在线精品一区二区| 午夜免费福利小电影| 国产又粗又猛又大爽又黄| 亚洲av无码一区东京热久久| 欧美老熟妇又粗又大| 欧美 国产 综合 欧美 视频| 精品久久人人爽天天玩人人妻| 久久精品国产亚洲av久| 亚洲熟妇无码爱v在线观看| 中文字幕奈奈美被公侵犯| 少妇白浆高潮无码免费区| 日本精品无码特级毛片| ass年轻少妇浓毛pics| 伊人天堂av无码av日韩av| 成人毛片A级毛片免费观看网站| 人妻无码一区二区三区| 国产精品久久久久久久| 蜜臀av午夜一区二区三区| 亚洲欧美婷婷五月色综合| 久久精品九九热无码免贵| 欧美巨大gay| 亚洲av无码一区二区三区性色| 在线观看亚洲AV日韩A∨| 亚洲熟妇av一区二区三区宅男| a片毛片免费无限观看| 精品国产成人亚洲午夜福利| 国产精品久久人妻互换| 久久无码人妻丰满熟妇区毛片| 蜜芽AV人妻久久无码精品| 无码人妻品一区二区三区精99| 99久久久国产精品免费蜜臀 | 亚洲熟女色情网中文字幕| 免费十大禁用软件安装下载| 麻豆熟妇人妻XXXXXX| 亚洲av无一区二区三区久久\| 丰满少妇被猛烈进AV毛片| 国产精品沙发午睡系列| 成全视频在线观看在线播放高清| 一二三四免费观看在线视频中文版 |