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介紹牛血清白蛋白常見的問題解決方法

更新時間:2022-01-21      點(diǎn)擊次數(shù):1895
  牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保護(hù)或載體作用,不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對多數(shù)底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更*,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時,牛血清白蛋白可以使酶更加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓Q灏椎鞍椎姆磻?yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
  牛血清白蛋白的常見問題有哪些:
  1、標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白在應(yīng)用時濃度要適宜,不可太高。牛血清白蛋白組分V現(xiàn)配現(xiàn)用,已經(jīng)配好的溶液即使是-20度保存一段時間后也會造成你的結(jié)果偏高。
  2、牛血清白蛋白由熱容易凝固,當(dāng)加熱到50°C或以上時,白蛋白相當(dāng)迅速形成疏水性聚集體,不恢復(fù)到冷卻后的單體,在某種程度上低溫聚合預(yù)計(jì)也將會發(fā)生的,但是在相對較低的利率。
  3、天然牛血清白蛋白(BSA)的等電點(diǎn)為4.6~5.8,經(jīng)無水乙二胺(EDA)和碳化二亞胺(EDC)反應(yīng),改性后的牛血清白蛋白等電點(diǎn)為8.6。
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