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線粒體染色試劑盒的作用說(shuō)明

更新時(shí)間:2018-04-20      點(diǎn)擊次數(shù):1450
  線粒體染色試劑盒是設(shè)計(jì)用來(lái)標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體的,使之帶綠色熒光。本試劑盒使用一種專(zhuān)屬染料,選擇性地在不同膜電位的線粒體中積累。這種線粒體指示劑是一種疏水性復(fù)合物,可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中,且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長(zhǎng)時(shí)間,因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高。本標(biāo)記方法十分穩(wěn)定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它也可以用于多種不同類(lèi)型的研究中,包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和*細(xì)胞標(biāo)記方法。它適用于增殖型和非增殖型細(xì)胞,也可以用于懸浮和貼壁細(xì)胞。
 
  線粒體染色試劑盒是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針,JC-1染料表現(xiàn)出電勢(shì)依賴性的積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光Ex=585 nm, Em=590 nm不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。
 
  線粒體染色試劑盒的破壞是細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的一個(gè)標(biāo)志性事件。細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加,使得線粒體蛋白包括細(xì)胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內(nèi)切酶G(EndoG)、凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)等從線粒體基質(zhì)釋放到細(xì)胞漿。細(xì)胞色素C的釋放伴隨膜電位的*喪失,進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞凋亡酶的級(jí)聯(lián)效應(yīng).本試劑盒提供了CCCP 作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽(yáng)性對(duì)照.對(duì)于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)100 個(gè)樣品;對(duì)于12 孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)200 個(gè)樣品.這種特殊的試劑盒被設(shè)計(jì)為大的斯托克斯位移在Ex/Em = 405/550 nm處標(biāo)記活細(xì)胞線粒體,使之帶橙色熒光;試劑盒使用專(zhuān)有的染料,選擇性地積聚在不同膜電位的線粒體中.是一種疏水性復(fù)合物,可以容易地滲透到完整的活細(xì)胞中,在進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長(zhǎng)時(shí)間,因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。這個(gè)關(guān)鍵的功能,顯著的提高了其染色效率。試劑盒中使用的線粒體染色非常耐光,使得熒光相當(dāng)強(qiáng)勁。它可以很容易地適應(yīng)各種各樣的熒光平臺(tái),如微孔板檢測(cè)、免疫細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞儀;以及各種各樣有用的的研究,包括細(xì)胞粘附、趨化性、多藥耐藥、細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。
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